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IHC技术攻略——蜡块修修与切切

发布时间：2021-7-21 17:42:35

前言：

一张优秀的切片，“切”这一步也不能忽视，切片看似很简单，但其中蕴含着很大的技术含量，同时也考验病理技术人员的切片水平，严格按照操作规范要求进行操作的同时，注意一些细节对提高切片的质量很有帮助。

在实际制片过程中无论如何遵守操作规范，切片环节总会出现一些小问题，如切片不规则、跳片、厚了、薄了，弯曲、划痕及破碎等情况。在镜下就会表现为空洞或染色缺如，不仅影响切片的美观，更主要的是影响后续的诊断。注意切片中的一些小细节，有助于做出更标准的切片。

切片前的准备

磨刀：非一次性刀应使用一次磨一次，磨刀10-15分钟，以手触刀刃有针刺样感觉；一次性刀片注意更换，一个刀口切超过6-8个蜡块或切片出现刀痕时建议更换。
修蜡：原则是粗修——细修——精修
粗修：设定进刀幅度应充分考虑组织大小及性质。一般情况，2cmx1.5cmx0.3cm大小标准组织块，质地中等粗修幅度可设定在20-30μm，一些小标本建议粗修幅度应小于10μm。
细修：以4μm厚度细修，细修时动作轻柔仔细观察修出的蜡片是否平整光滑。

切片小技巧

修蜡和切片不使用同一刀位，这样做省刀也提升质量；
使用新刀片时先切小组织或淋巴结等实性组织，后切脂肪、肌肉组织，最后切骨组织；
固定蜡块时注意包埋方向、组织层次等，将难切部分放在上面，如皮肤，包膜，浆膜等；
操作切片机时用力均匀，建议2秒一圈。

切片问题的处理

切片卷起、粘片、不连片
可能原因：刀锋不够锋利，刀的方向角度不对，切片太厚，蜡块不够冷或空气干燥。
处理措施：查找原因对应处理，检查刀片；增加室内湿度；冰一下蜡块切面；边切边向蜡片吹气；降低室内温度；调整切片厚度。
蜡片弯曲
可能原因：蜡块不规则或未修平，刀与蜡块不平行
处理措施：修平、修全蜡块，调整刀片的左右高度，保证蜡块底缘与刀口水平线平行。
薄厚不均
可能原因：刀架损伤，压板与刀架间有蜡，切片机配件松动或老化，蜡块过硬。
处理措施：检查确认原因，实行清洁，更换配件；蜡块过硬可复温湿润后切片。
切片出现划痕、裂痕
可能原因：刀有缺口，蜡有杂质，组织有钙化，骨片或线结。
处理措施：换刀；去除异物；如果是钙化或有骨质原因，将组织面放置30%盐酸上数小时清洗后，再切。
切片出现波纹样
可能原因：组织处理时过度脱水，刀顿，角度太大或切片速度太快。
处理措施：明确是因为脱水过度造成的可用湿纱布沾温水擦拭组织面有助于缓解。
切片破碎、不全
可能原因：组织问题，脱水不佳，脱水透明过度，浸蜡温度过高或时间过久。
处理措施：组织脱水不佳的可将蜡块放入65℃温箱蜡缸中过夜，重新包埋切片；脱水过度可冷冻湿润下蜡块再切。
筛状空洞
可能原因：没有细修，肝脏、扁桃体、淋巴结、脾脏等特殊组织常见
处理措施：细修到表面无白点；易脆组织可适当复温，慢切。
特殊组织处理
淋巴结组织：切片前拇指沾温水捂5-6秒后用冰冰3-4秒立即切片。
脂肪组织：切片前用冰冰5-10秒后立即切片，可切出完整组织。
凝血块多的组织：切片前拇指沾温水在组织面捂几秒后立即切片，不易碎。
脑组织：切片易粘刀有褶皱，切片前拇指沾温水捂5-6秒后用冰冰3-4秒立即切片。